Los  Pericitos:  Nuevos  Enfoques  en  la  Terapia

 Regenerativa,  Patología  Cerebrovascular  y  Cáncer

Que son

Los pericitos son células perivasculares pluripotentes capaces de diferenciarse en tejidos provenientes de las tres capas germinales  y que poseen características de células madre con un gran potencial clínico.

Origen

tienen un origen complejo ya que se pueden desarrollar a través de diversas fuentes tales como:

• la sangre del cordón umbilical
• cresta neural  (pericitos del cerebro) 
• médula osea

Funciones 

Regulación del flujo sanguíneo 

los pericitos dentro de los vasos producen vasoconstricción y vasodilatación para regular la irrigación cerebral previniendo así el desarrollo del infarto cerebral 

Funciones de supervivencia neuronal 

• forman una barrera hematoncefalica para proteger a las neuronas 
• forman neuroesferas de donde provienen astrocitos oligodentrocitos y neuronas 
•  evitan la hipoxia cerebral 

Detección de estímulos angiogenicos

detecta el precusor proangiogenico llamado hemangioblastos  

Procedimiento:

Se realiza un estudio de modelos animales con isquemia cerebral. Al estudiar estos ratones se demuestra que los pericitos  contiene nestina, GFAP, NF1 que son  marcadores de células progenitoras neuronas las cuales dan origen a nuevas neuronas y células gliales .Ademas se demostró que los pericitos del SNC tienen el potencial de producir una neurogenesis dirigida después de un accidente cerebrovascular.

Pericitos en el cáncer

los pericitos,  se encuentran en lo que se llama el microambiente de un tumor canceroso en realidad pueden detener la progresión del cáncer y la metástasis. Y por la destrucción de estas células, algunas terapias contra el cáncer pueden estar haciendo el cáncer más agresivo sin darse cuenta , así como aumentar las probabilidades de propagarse y matar.

los pericitos constituyen la defensa natural del cuerpo cubren los vasos sanguíneos y apoyan su crecimiento

Tomado de:

http://www.scielo.cl/pdf/ijmorphol/v29n3/art17.pdf

Potencial terapéutico de las células madre en la 

enfermedad cerebrovascular

Objetivo:

los objetivos del trasplante de células madre en ECV es  dar soporte trófico a las neuronas existentes con el fin de evitar la degeneración excesiva y promover el crecimiento e integración de las nuevas neuronas para sustituir a las que se perdieron después de la lesión.

Vía de administración: 

La vía de administración de las células madre puede ser:

•  sistémica (vasos sanguíneos) 
•  local (cerebro)

Procedimiento:

Las Celulas madre neuronales (CMN)  pueden ser cultivadas en presencia de factores de crecimiento, lo que da lugar a la formación de neuroesferas, de donde se logra generar neuronas, astrocitos, oligodendrocitos e incluso pueden ser capaces de reemplazar a la mayoría de los tipos de células afectadas por una lesión isquémica y formar conexiones con las células del huésped. Después de un trasplante con CMN se ha visto que las células madre poseen efectos neuroprotectores e inmunomoduladores.

Además de las CMN, en este tipo de terapia para ECV en modelos de animales son las células de la médula ósea y células de la sangre del cordón umbilical, pues son pluripotentes  y su empleo ha demostrado disminución en el tamaño del infarto y en modelos de animales mejoría en   la recuperación funcional.

Resultados:

Se demostró que entre 12 a 18 meses de transcurrido el evento la mitad de los pacientes tuvo una mejoría  de 3 a 10 puntos. Estas técnicas de tratamiento han demostrado ser seguras, bien toleradas por animales y humanos y conducen a una mejoría neurológica funcional y motora.

Tomado de:

http://www.medicasuis.org/anteriores/volumen23.1/doc7.pdf

Terapia Génica para Enfermedades Cerebrovasculares

  

Mediante Terapia Génica se han expuesto, in vitro en una placa de Petri, neurona de rata a un virus herpes que porta el gen codificante de una proteína que acarrea moléculas de glucosa a través de la membrana celular. Estas proteínas se expresaron y aumentaron el nivel de glucosa en el interior de las neuronas. 

En un paciente que sufriera una crisis neurológica, un tratamiento de este tipo incrementaría la absorción de glucosa, que proporcionaría a las neuronas energía extra para el transporte activo del exceso de calcio fuera de las células involucradas.

 Luego se comprobó que en el animal (rata) se puede reducir la lesión causada por el accidente cerebrovascular  inyectando el vector vírico en la región vulnerable del cerebro antes de que se produjera el percance. 

Se han construido vectores herpesvirus que incluían el gen supresor del suicidio bcl-2. La aplicación de este vector tiende a proteger de la lesión a las células cerebrales de las ratas cuando se producen condiciones de crisis, sin que importe que el tratamiento comience después de la lesión.

tomado de:

http://www.rincondelasciencias.com/aplicaciones%20%20de%20%20la%20%20terapia%20%20genica.pdf

Ejemplo de transgénico en la Enfermedad de Alzheimer (EA)

Diversos laboratorios han producido ratones transgénicos que exhiben algunos de los cambios patológicos asociados a EA. Esto ha ocurrido, por ejemplo, con los transgénicos que expresan niveles muy altos de la proteína amiloide β humana (gen APP, amyloid precursor protein) en su forma wildtype o una forma mutante (particularmente una mutación puntual encontrada en pacientes con EA). Ambos modelos comparten grandes similitudes con los casos humanos; sin embargo, las placas seniles (uno de los rasgos histopatológicos característicos de EA) se encuentran sólo en los ratones transgénicos para el gen mutado. Ninguno de los dos tipos de transgénicos para el gen APP desarrolla ovillos neurofibrilares, la otra lesión histopatológica característica de EA. Cabe destacar que estos ratones transgénicos exhiben defectos en el aprendizaje, así como alteraciones cerebrales al envejecer. Además, se ha demostrado que el fondo genético de los ratones tiene un efecto muy fuerte sobre el fenotipo. Siendo que la función del gen APP es muy poco conocida (más allá de ser requerida para el funcionamiento neuronal), estos ratones son un modelo muy útil para comprender el papel del gen APP en pacientes con EA.

tomado de:

http://www.transtechsociety.org/docs/books/Benavides_Guenet_2003/09-GENETICA.pdf

Una “librería” de genes o genoteca es un conjunto de clones, cada uno de los cuales está formado por un vector que contiene un fragmento de ADN.

 Ejemplo de genoteca en enfermedades cerebrovasculares

Empleando sondas de oligonucleótidos degenerados, se generaron fragmentos de cDNA que fueron utilizados para aislar el cDNA de la neuroserpina a partir de una genoteca de cerebro de embrión de pollo.Las búsquedas en bases de datos empleando la secuencia de aminoácidos revelaron un alto grado de similitud con miembros de la familia de los inhibidores de serín proteasas. Sin embargo, no era igual en su totalidad a ninguna de las otras serpinas conocidas, excluyendo así la posibilidad de que se tratase del homólogo en pollo de ninguna de las serpinas conocidas en mamíferos. Por esta razón, y debido a su expresión neuronal específica, a la nueva proteína se le denominó neuroserpina y recibió la denominación de Proteinase Inhibitor 12 (PI12) o SERPINI1 en la terminología

Tomado de: 

http://www.aeped.es/sites/default/files/anales/47-4-23.pdf

http://www.google.com.ec/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=23&ved=0CDsQFjACOBQ&url=http%3A%2F%2Fdspace.usc.es%2Fbitstream%2F10347%2F2771%2F1%2F9788498873412_content.pdf&ei=HJCyUM-HGpDQ9ATV_IHICg&usg=AFQjCNHb9PB3J717ePGrTolvnY6gcgvYDA&sig2=j2XaHbqbJ2tqOTBBZUYbew

Ejemplo de ADN Recombinante en la naturaleza

 Se introduzca el DNA clonado en la célula huésped (en este caso Escherichia coli). En bacterias, el proceso de introducir DNA purificado dentro de una célula se llama transformación. Para Escherichia coli, uno de los métodos de transformación requiere que las células sean tratadas con CaCl₂ en frío, seguido de una breve exposición (c.a. 90'') a alta temperatura (42°C). Pero la transformación es un proceso poco eficiente ya que normalmente se transforma una célula de mil y de éstas células transformadas pueden haberlo sido por el plásmido recircularizado que ha escapado a la defosforilación por fosfatasa alcalina, otras adquieren DNA no plasmídico y unas pocas son transformadas por la construcción del plásmido-DNA insertado.

Para asegurarnos que esta construcción se va a perpetuar en su forma original, las células huésped de Escherichia coli usadas no deben poseer los genes que codifican para los enzimas de restricción y así evitar que la construcción incorporada sea degradada por estos enzimas. Además estas células no deben ser capaces de llevar a cabo intercambios de moléculas de DNA (RecA^-) y así evitar que el DNA insertado no sea alterado debido a la recombinación homóloga que pudiera ocurrir.

Tomado de :
http://darwin.usal.es/profesores/pfmg/sefin/MI/tema11MI.html

  Uso de ADN recombinante en el tratamiento de accidentes cerebrovasculares: Heberkinasa

La tecnología del ADN recombinante se ha aplicado para crear  fármacos recombinantes los cuales han sido aplicados en el tratamiento de los accidentes cerebrovasculares. Entre los principales farmacos recombinates tenemos:

Heberkinasa, uno de los trombolíticos mejor evaluados clínicamente al momento de un infarto cerebral, es una estreptoquinasa (Sk) recombinante, la técnica de recombinación del ADN, permitió aislar el gen en la cepa S. equisimilis H46A. La Sk es una proteína aislada de la bacteria estreptococos, ejerce su acción terapéutica mediante la activación del plasminógeno presente en la sangre y su conversión a plasmina, provocando hiperplasminemia, depleción de fibrinógeno circulante y de los factores V y VIII de la coagulación, aumentando la degradación de la fibrina.

Otros farmacos recombinantes que tienen la misma efectividad que la Sk son  el Streptase, Alteplase, Tecneteplase.

Tomado de:

http://www.elcomprimido.com/FARHSD/EVALTENECTEPLASA.pdf

http://med.javeriana.edu.co/publi/vniversitas/serial/v49n4/3-ATAQUE.pdf

http://caccv.org.ar/raccv/01-2009-06.pdf